在实验室培养细胞的过程中，许多研究人员可能会遇到细胞生长不佳的情况。胎牛血清（FBS）作为细胞培养中最重要的成分之一，对细胞的生长状态起着关键作用。因此，本文将总结一些在使用胎牛血清时需要注意的提示，供大家参考，记得收藏哦。

胎牛血清的保存方法

购买回来的胎牛血清通常可以在-20℃下保存，若需长期储存，建议放置于-80℃。为了减少反复冻融的次数，最佳做法是根据每次使用量将其分装并冷冻。使用时按需解冻，亦可直接购买小规格的50mL包装，使用方便快捷。

胎牛血清的解冻方法

在解冻胎牛血清时，推荐将其从低温环境中取出后，放入2-8℃冰箱中解冻（可过夜），使其部分溶解后再在室温下完成全部的融解。解冻过程中应不时摇动瓶身，以帮助均匀混合。此外，建议避免将血清直接放入25-37℃的环境中解冻，这可能导致沉淀形成，从而影响血清中一些物质的活性，进而影响细胞的生长和增殖。

关于解冻后沉淀的成因

胎牛血清解冻后可能出现的沉淀物主要包括纤维蛋白、脂蛋白、冷凝集素等。这些沉淀物通常是由于血清中的某些成分在解冻过程中的变化造成的。纤维蛋白是最为常见的沉淀物之一，通常以絮状形式出现，可以通过离心去除。沉淀本身并不影响血清的质量，只需在培养基中加入血清后，通过离心去除沉淀。

是否需要对胎牛血清进行额外过滤？

一般情况下，经过严格无菌处理的胎牛血清不需要额外过滤。如果考虑到沉淀物，可以通过离心法去除。如有必要，可以在加入培养基后进行过滤，以最大程度减少对营养成分的损失。

细胞消化的正确方法

当细胞长到约80%汇合度时，可进行消化。先用PBS清洗细胞2-3次，再将配置好的胰酶（通常为0.25%浓度）预热至37℃。以1mL胰酶消化T25培养瓶中的细胞，消化时间一般为2-5分钟。观察细胞是否变得松动并呈圆形。如果细胞未达到这一状态，需继续放回培养箱消化。此外，可以轻拍培养瓶的侧面以加速细胞脱落。不要等到全部细胞都变圆再终止消化，避免过度消化。

更换胎牛血清品牌的操作方法

在更换胎牛血清品牌时，通常以10%的比例添加（90%培养基+10%胎牛血清），某些细胞可能需根据具体情况调整至5%或15%。如果突然更换品牌，细胞的增殖速度可能会变慢，甚至导致细胞死亡。因此，建议实施渐进式替换，以帮助细胞适应新环境。可在复苏细胞时使用原品牌血清，传代1-2代后再逐步引入新的血清。

显微镜下的小黑点是什么？

在显微镜下观察到的小黑点可能是细菌污染、真菌污染、细胞碎片或血清沉淀等多种原因造成的。细菌污染常伴随培养液的浑浊，而血清沉淀则通常呈均匀分布的状态。对于这些问题，建议在显微镜下仔细观察，以辨别污染源。一旦确认污染情况，应及时处置，消毒所有设备，确保细胞培养的安全。

胎牛血清是否需要灭活？

对于绝大多数细胞培养而言，胎牛血清通常不需要进行加热灭活。然而在某些特殊实验条件下，如免疫学研究和胚胎干细胞培养时，使用灭活血清是推荐的。加热过程应保持在56℃，持续30分钟，并需不断摇动以确保均匀混合。

选择优质的胎牛血清对实验室细胞培养至关重要。对于希望获得最佳实验结果的科研人员，强烈推荐使用ag尊龙凯时的胎牛血清。我们的产品经过严格的质量控制，确保为您的细胞培养提供可靠的支持。