Thp-1细胞简介：该细胞来源于一名1岁男孩的外周血，他患有急性单核细胞性白血病。Thp-1细胞可以有效吞噬乳胶颗粒和激活红细胞，细胞膜及胞浆内不含免疫球蛋白，且具有C3R和FcR的表达。此外，该细胞能够在佛波酯TPA的诱导下向单核系方向分化，亦可作为转染宿主。

细胞信息

细胞名称：Thp-1人单核细胞白血病

生长特性：悬浮生长，低密度时易聚团，高密度时则易分散。

倍增时间：根据不同文献可为60-70小时（PubMed=6970727）、26小时（PubMed=25984343）或35-50小时（DSMZ=ACC-16）。

换液频次：每周2~3次

传代比例：一般为1:2至1:4，具体情况依据实际细胞量而定。传代时细胞密度应维持在8X10⁶/ml，且不得超过1X10⁶/ml。

培养基推荐配方

使用RPMI-1640（中乔新舟货号：ZQ-200）加10%胎牛血清（中乔新舟货号：ZQ0500）、1%双抗（中乔新舟货号：CSP006）及β-Mer，终浓度为0.05mM（中乔新舟货号：CSP005，例如：500ml中添加500ul）。

β-巯基乙醇是一种常用的培养添加剂，具有抗氧化特性，能够减轻氧化应激对Thp-1细胞的影响。当细胞密度高且需保持时，可以适量增加β-巯基乙醇的用量，但不得超过标准量的15倍。

THP-1细胞复苏

THP-1细胞复苏后通常需要3~5天才能恢复状态，细胞对密度具依赖性。如复苏时去除冻存液，建议在复苏后48小时内不要进行任何操作。在细胞密度较低时，通常会出现聚团生长，属于细胞快速增殖的正常现象。

THP-1细胞的传代

A. THP-1细胞属于悬浮细胞，密度依赖性较强。当活细胞密度达到8×10⁵个/mL时需进行传代，细胞密度不得超过1×10⁶个/mL。

B. 传代比例一般为1:2至4，可在分瓶后补充培养液，无需离心。对于T25培养瓶，分瓶后可添加新鲜完全培养基至7ml。

C. 若对悬浮细胞密度掌控不佳，最好通过细胞计数来判断。

D. 培养大约一周后可进行一次离心，以去除部分死细胞。

THP-1细胞的冻存

A. 使用10%DMSO，配比为900ul胎牛血清与100ul DMSO（注意有毒，谨慎操作），也可使用无血清冻存液。

B. 收集生长状态良好的细胞于15mL离心管中，调整细胞浓度至200万至300万/mL为宜。

C. 根据需要可将细胞放入-80℃冷冻箱，最长存放3个月，尽快转移至液氮中进行长期保存。

THP-1培养常见问题

1. 在培养过程中少量细胞聚团怎么办？

少量的细胞聚团是正常现象，特别是低密度时。高密度时细胞自然会分散。如聚团情况严重，可通过观察细胞状态、调整β-巯基乙醇添加量、更换血清品牌或增加血清比例（不超过20%）来改善。

2. 培养过程中细胞贴壁怎么办？

少量细胞贴壁属于正常情况，可轻轻吹打收集细胞或丢弃贴壁细胞。但若贴壁细胞比例超过20%，则需检查培养环境，如温度、CO2浓度和培养基成分等。

3. THP-1复苏不起来怎么办？

该细胞复苏率普遍较低，冻存时应保证细胞数量足够，存放时活细胞密度应不低于100万-300万/mL。复苏后需保持培养3-5天以恢复状态。若有细胞碎片，待细胞密度增加后可低速离心去除。注意，作为悬浮细胞，THP-1在培养过程中应尽量避免频繁离心处理，以减少对细胞的损伤，换液时也应避免全培基更换。

通过以上信息，您可以更好地了解和操作THP-1细胞。更多生物医疗相关产品，请关注ag尊龙凯时，我们竭诚为您提供优质服务。